Sådan denatureres et protein

Måske vil du denaturere et protein til et videnskabsprojekt, eller måske har du læst om denatureret mad og vil gerne vide, hvordan det virker. Denaturering er den proces, hvormed et protein taber sin form og struktur på grund af handlinger fra eksterne kræfter, herunder varme, stråling, syrer og opløsningsmidler. Organiske opløsningsmidler normalt denature proteiner. Den nøjagtige måde, hvorpå du denaturerer på et protein, afhænger af den særlige, du vil arbejde med, da de alle kræver forskellige denatureringsmidler på forskellige niveauer. De fleste protein kan dog denatureres, hvis du ved hvad du skal ændre i proteinets miljø.

Trin

Metode 1 af 2:
Denaturering af et protein
  1. BILLEDE TITLED DENATY AATY AT PROTEIN TRIN 1
1. Brug varme. Varme er en af ​​de nemmeste måder og mest almindelige måder at afgive et protein på. Når det pågældende protein er til stede i mad, vil det blot lave mad på proteinerne. Mange proteiner kan denatureres ved at udsætte dem for en temperatur på eller over 100 ° C (212 ° F). Dette gør det muligt for proteinerne at koagulere og reducere deres opløselighed.
  • Eksponeringslængden afhænger af, hvad du udsætter for varme. Et æg kan for eksempel koge i en pande på medium varme om fem minutter, mens en stege kan tage timer at lave mad i en ovn.
  • BILLEDE TITLED DENATY AEATY A PROTEIN TRIN 2
    2. Anvend alkohol. Alkohol forstyrrer de hydrogenbindinger, der forekommer mellem amidgrupper af en peptidbinding. Når et protein udsættes for en alkoholopløsning, danner alkoholmolekylerne nye bindinger med proteinkæden. Brug en opløsning af 70% alkohol til at bryde gennem cellevæggen af ​​bakterier og denature proteinet.
  • Koncentrerede alkoholer kan være farlige, da de både er brandfarlige og toksiske. Brug altid fuldt sikkerhedsudstyr, herunder handsker og øjenbeskyttelse, og håndteres i et sikkert, temperaturstyret miljø.
  • Billedbet med titlen Denature A Protein Trin 3
    3. Skift ph. Den indre struktur af et protein kan opdeles, når miljøet er meget sur eller meget alkalisk, da de forstyrrer de ioniske bindinger, der holder proteinets saltbroer sammen sammen. Tilsæt en syre- eller baseopløsning til proteinet. Det omgivende miljø bør være på en pH på over 10 eller under 4 for at tilskynde denaturering. Hvis du inducerer ændringen med syre, skal pH være mellem 2 og 5.
  • Ændring af pH kan ionisere en aminosyre afhængigt af PKA af hver funktionel gruppe i den aminosyre. Du kan også ionisere aminogruppen eller carboxylgruppen til stede i aminosyren.
  • BILLEDE TITLED DENATY AATY AT PROTEIN TRIN 4
    4. Prøv heavy metal salte. Tungmetaller kan forstyrre bindinger i proteinet, hvilket får det til at miste sin struktur. Salte af tungmetaller, såsom kviksølv og bly, kan anvendes til at denaturere forskellige proteiner. Sådanne salte er tilgængelige fra de fleste kemiske leverandører, og bør altid bruges med forsigtighed og korrekt sikkerhedsudstyr, herunder handsker og øjenbeskyttelse.
  • Tungmetaller kan interagere med et proteins funktionelle sidekædegrupper for at danne komplekser. Tungmetaller oxiderer også proteinets aminosyre-sidekæder.
    • Metode 2 af 2:
    Renaturering proteiner
    1. BILLEDE TITLED DENATY AATY AT PROTEIN TRIN 5
    1. Bestem, om et protein kan refold. Nogle former for denaturering er permanente, mens andre kan fortrydes. Kogning af et æg eller en kød, for eksempel kan ikke fortrydes, men et protein, der har været udsat for en høj pH, kan genvinde form, når de sættes i et mere neutralt miljø.
    • Hvorvidt proteinet kan genfoldes vil afhænge af dets DNA. DNA`et vil holde de oplysninger, der er nødvendige for proteinet for at vende tilbage til dens native tilstand.
  • BILLEDE TITLED DETATON ATATY A PROTEIN TRIN 6
    2. Fjern denatureringsfaktoren. Returnere miljøet omkring proteinet til stasis og fjern detatureringselementet. Fjern syre eller base, for eksempel eller bring proteinet tilbage til en mere rimelig temperatur.
  • BILLEDE TITLED DENATY ATATIONER A PROTEIN TRIN 7
    3. Brug et renaturationssæt. Mange laboratorieartikler virksomheder sælger renatureringssæt, der giver dig mulighed for at screene for de bedste parametre for at opmuntre renaturering. Sådanne kits kan være særligt nyttige, hvis du ser på proteiner i et laboratorium eller eksperimentel indstilling.

    • Tips

    Et denatureret protein mister sit quarternary, tertiær og sekundær struktur, der er tydelig i sin oprindelige tilstand, men den primære struktur vil forblive.
  • Et denatureret protein taber også en del af sin bioaktivitet, i nogle tilfælde som med enzymer, mister sin evne til at fungere. For eksempel kan substrater ikke længere kunne binde til enzymer, der er blevet denatureret.
  • Det denaturerede protein kan miste sin opløselighed i en opløsning.
  • Du kan også denaturere nukleinsyrer ved hjælp af laboratorieteknikker til at adskille trådene.
    • Del på sociale netværk :
    Lignende